基质胶应用(2)—HUVEC血管形成实验-技术前沿-资讯-生物在线

基质胶应用(2)—HUVEC血管形成实验

作者:翌圣生物科技(上海)股份有限公司 2025-06-06T00:00 (访问量:2281)

HUVEC(人脐静脉内皮细胞)是研究血管生成的核心模型细胞,其高增殖能力和成管特性可模拟肿瘤血管新生过程。通过将HUVEC接种于基质胶(模拟基底膜微环境),细胞可在体外形成复杂的三维管状网络结构,广泛用于:

✅ 抗血管生成药物筛选
✅ 肿瘤微环境机制研究
✅ 血管生成相关基因/信号通路验证

 

PART.02

实验步骤

实验前一天将Ceturegel®基质胶置于冰盒中,放入 4℃冰箱,使胶能过夜缓慢融化。

开始实验前,将Ceturegel®基质胶始终保持放在冰盒中。

准备24孔板,于每孔中加入100µL - 150µL Ceturegel®基质胶,避免产生气泡。在37℃培养箱中放置30 min - 1 h。(注意枪头要垂直于内孔的正上方加入 Ceturegel®基质胶,防止有孔壁残留基质胶。若是孔的底部没有铺满胶,可以晃动一下孔板,使底部铺胶均匀)。

当HUVEC细胞长满70 ~ 80%时,消化下来,并用含10%FBS的DMEM重悬,计数,使每孔加入1.2×105细胞/孔,重复三孔。

37℃培养箱孵育,每4 h观察1次,4 - 18 h可见血管生成。

小心的移除上孔内培养基,注意不要碰到胶或者细胞网络。加入Calcein染料进行染色。

结果观察。

 

PART.03

实验结果

图.血管生成结果及染色图

 

PART.04

常见问题及解答

为什么我的成管实验中细胞 不能形成连续的网格?

QA

①建议使用3-5代状态较好且融合度70%-80%的HUVEC细胞进行成管试验,此时细胞成管能力比较强。
②超过15代HUVEC细胞成管能力明显降低。
③细胞数量过少会使细胞无法形成连续的网络。

成管实验到底需要几个小时?

QA

成管时间与细胞状态密切相关。细胞状态好时成管时间短。建议第一次实验时,每4个小时观察一次。

 

PART.05

产品推荐

产品名称

货号

规格

Ceturegel® Matrix GFR,Phenol Red-Free,LDEV-Free基质胶

40186ES

1.5 mL/5 mL/10 mL

Fetal Bovine Serum Gold 胎牛血清(特级)

40130ES

50 mL/500 mL

Calcein,AM,Ultrapure Grade 钙黄绿素,超纯级

40719ES

1×50μg/2×50μg

DMEM/F-12 培养基

41406ES

500 mL

 

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