与mRNA两端暴露不同,circRNA分子呈共价闭合环状结构,不易被RNase降解,具有较高的稳定性,因而大大延长了其半衰期,从而达到长时效的目的。同时也是因为其结构的特殊性,较难被机体的抗原识别受体识别,因此不需要修饰核苷酸的引入降低免疫原性,从而降低了合成成本。
circRNA体外合成常见方法包括:I型内含子自剪接、Ⅱ型内含子自剪接及T4 RNA连接酶介导的酶法连接。近岸蛋白推出的Circular RNA Synthesis Kit (PIE I)(Cat.No.:E336),基于I型内含子自剪接机制,实现高效、便捷的circRNA制备。
试剂盒配备体外转录全套试剂、环化专用Buffer和LiCl纯化试剂,操作流程简单。通过体外转录获得RNA前体,经环化反应,环化效率可达70%以上。
合成后的circRNA可通过RNase R(Cat. No.:E224)处理纯化后,获得更高纯度的目标产物,适用于后续功能研究或体内外实验。
数据展示
1 circRNA合成
图例)使用Circular RNA Synthesis Kit (PIE I)进行eGFP circRNA(泳道1-3)和Luciferase circRNA(泳道4-6)合成,经过环化反应后大部分Pre RNA环化成circRNA。RNase R去除线性RNA后,circRNA纯度进一步提升。
2 circRNA表达
eGFP mRNA和circRNA在293T细胞中表达
与eGFP mRNA相比,circRNA维持高水平表达。

与Luciferase mRNA相比,circRNA维持高水平表达。
两款circRNA药物相继获批临床,无疑给众多circRNA研究人员打上了一剂强心针。随着序列设计的不断优化,环化工艺的进一步探索,伴随circRNA的各项技术壁垒也将会逐步打破,越来越多的研发管线满足临床治疗需求,circRNA未来可期。
科研级RNA合成相关产品
应用场景 | 目录号 | 名称 |
质粒线性化 | RE057 | BspQI |
RE015 | XbaI | |
RE106 | PmeI | |
RE107 | NotI | |
RE108 | HindIII | |
mRNA合成 | E332 | T7 High Yield RNA Transcription Kit 2.0 |
E334 | T7 High Yield RNA Transcription Kit 2.0 (N1-Me-pUTP) | |
E131 | T7 High Yield RNA Transcription Kit | |
M082 | Cap 1 Capping System | |
M012 | E.Coli Poly A Polymerase | |
E331 | T7 High Yield RNA Co-Transcription Kit for Low dsRNA with CAP1 GAG | |
E431 | T7 High Yield RNA Co-Transcription Kit for Low dsRNA with CAP1 GAG (3‘OMe) | |
saRNA合成 | E231 | T7 High Yield RNA Transcription Kit for Long Fragment with CAP1 GAG |
E233 | T7 High Yield RNA Transcription Kit for Long Fragment with CAP1 GAU | |
E341 | T7 High Yield RNA Transcription Kit for Long Fragment | |
circRNA合成 | E336 | Circular RNA Synthesis Kit (PIE Ⅰ) |
circRNA纯化 | E224 | RNase R |
mRNA | MR008/MR010 | eGFP mRNA/eGFP mRNA (N1-Me-Pseudo UTP) |
MR009/MR011 | Luciferase mRNA/Firefly Luciferase mRNA (N1-Me-Pseudo UTP) | |
MR105 | mCherry mRNA (N1-Me-Pseudo UTP) | |
MR204 | tdTomato mRNA (N1-Me-Pseudo UTP) | |
MR203 | Cre mRNA (N1-Me-Pseudo UTP) | |
MR015 | OVA mRNA (N1-Me-Pseudo UTP) | |
MR016 | hEPO mRNA (N1-Me-Pseudo UTP) | |
MR019/MR107 | Cas9 mRNA (N1-Me-Pseudo UTP)/Cas9 Mrna | |
MR205 | Cas12bMax Enhanced mRNA (N1-Me-Pseudo UTP) | |
MR208 | enCas12Ultra mRNA (N1-Me-Pseudo UTP) | |
circRNA | MR201 | eGFP circRNA |
MR202 | Luciferase circRNA | |
saRNA | MR301 | eGFP saRNA |
MR302 | Firefly Luciferase saRNA | |
MR401 | eGFP saRNA (5-Methyl-CTP) | |
MR402 | Firefly Luciferase saRNA (5-Methyl-CTP) |